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title: "The Difference Between ELISA and PCR – in Bird Testing Services"
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taxonomy_category:
  - "Tecnologia PCR"
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## 1. PCR contro ELISA: Principi e confronti nella sperimentazione sugli uccelli

### 1.1 PCR (Reazione a catena della polimerasi)

La PCR è una tecnica di biologia molecolare utilizzata per amplificare specifiche sequenze di DNA o RNA. Il suo principio fondamentale prevede la denaturazione del DNA, ricottura del primer, ed estensione da parte della DNA polimerasi attraverso il ciclo termico, con conseguente amplificazione esponenziale delle sequenze target (Mullis & Faloona, 1987). Per i virus a RNA (per esempio., influenza aviaria), è necessaria una fase di trascrizione inversa, noto come RT-PCR.

### 1.2 ELISA (Saggio immunoassorbente legato a un enzima)

ELISA è un metodo immunologico basato sul legame specifico tra antigeni e anticorpi. Viene utilizzato per rilevare gli anticorpi (indicando esposizione o risposta immunitaria) o antigeni (come virus o proteine ​​batteriche) nei campioni biologici (Engvall & Perlmann, 1971).

## 2. PCR vs. ELISA: Confronto completo nei test sugli uccelli

| Categoria | PCR | ELISA |
| --- | --- | --- |
| Bersaglio | DNA o RNA (genoma patogeno) | Anticorpi o antigeni |
| Tipo di risultato | Presenza/assenza di sequenze genetiche specifiche (può essere quantitativo) | Presenza/assenza di risposta immunitaria (può essere quantitativo) |
| Sensitivity & Specificity | Molto alto | Da moderato ad alto, a seconda della qualità degli anticorpi |
| Complessità tecnica | Alto; richiede laboratorio di biologia molecolare | Moderare; adatto per laboratorio di immunologia |
| Costo | Più alto (strumenti e reagenti) | Inferiore; adatto per lo screening ad alto rendimento |
| Attrezzatura richiesta | Termociclatore per PCR, elettroforesi o macchina qPCR | Lettore ELISA, rondella per piastre |
| È tempo di risultati | Poche ore | Poche ore |
| Migliori casi d&#039;uso | Rilevamento virus, sesso, genotipizzazione | Valutazione del vaccino, monitoraggio immunitario |
| Riferimenti | Spackmann et al., 2002; Kidd et al., 2015 | OIE, 2021; Saif, 2020 |

## 3. Applicazioni pratiche nei test sugli uccelli – Focus sui piccioni

### 3.1 Rilevazione virale nei piccioni (PCR)

Nell&#039;allevamento dei piccioni, malattie virali come il paramixovirus del piccione (PPMV), virus dell&#039;herpes, e l&#039;adenovirus sono minacce serie. Utilizziamo abitualmente la PCR per lo screening di questi virus estraendo l&#039;RNA dai tamponi orali e cloacali e applicando la RT-PCR. Campioni ambientali (per esempio., acqua potabile, rifiuti, filtri dell&#039;aria) vengono testati anche per la sorveglianza.

**Perché utilizzare la PCR?**

- La PCR consente la diagnosi precoce, anche nei portatori asintomatici (Alessandro, 2000).
- Fondamentale per i piccioni riproduttori e viaggiatori per prevenire infezioni crociate.
- Tempi di consegna rapidi aiutano a prendere decisioni rapide (Kidd et al., 2015).

### 3.2 Determinazione del sesso dei piccioni (PCR)

Gli uccelli hanno cromosomi sessuali ZW (femmina: ZW; maschio: Zz). La PCR può differenziare il sesso prendendo di mira i geni CHD1 situati su entrambi i cromosomi, che differiscono per dimensioni. Dopo amplificazione ed elettroforesi su gel, maschi (Zz) mostra una band, femmine (ZW) mostrane due (Griffith et al., 1998).

**Perché usare la PCR per il sesso?**

- I piccioni giovani sono visivamente indistinguibili per sesso.
- Il sesso preciso è vitale per l&#039;accoppiamento nei programmi di allevamento.

### 3.3 Screening genetico delle prestazioni nei piccioni (PCR)

Gli studi suggeriscono alcuni geni (per esempio., ACTN3, PPARGC1A) possono riguardare la resistenza al volo e lo sviluppo muscolare negli uccelli. La PCR può identificare questi genotipi, assistere nell&#039;allevamento selettivo per le prestazioni nelle corse (Cieslak et al., 2011).

### 3.4 Monitoraggio dell&#039;efficacia del vaccino (ELISA)

Dopo la vaccinazione (per esempio., contro il paramixovirus del piccione), L&#039;ELISA viene utilizzato per valutare se sono stati prodotti anticorpi sufficienti, determinare l’efficacia dell’immunizzazione.

**Perchè ELISA?**

- Conveniente per i test in batch
- Sensibilità moderata; utile per valutare la durata degli anticorpi
- Valuta la copertura immunitaria e rileva il “fallimento del vaccino” (Saif, 2020)

Ad esempio, ELISA può essere utilizzato su 100 piccioni a 7, 14, E 28 giorni dopo la vaccinazione. Se i titoli sono al di sotto del livello di protezione, potrebbe essere necessaria una rivaccinazione o un aggiustamento del protocollo.

## 4. Riepilogo dei pro e dei contro

| Metodo | Vantaggi | Limitazioni |
| --- | --- | --- |
| PCR | Alta sensibilità/specificità; adatto per la diagnosi precoce, genotipizzazione, sesso | Costoso, tecnicamente impegnativo |
| ELISA | Conveniente per lo screening su larga scala; ideale per la valutazione post-vaccino | Potrebbe mostrare falsi negativi o reattività crociata |

## 5. Scenari applicativi in ​​breve

| Scenario | Metodo consigliato | Motivo |
| --- | --- | --- |
| Rilevazione precoce dell&#039;epidemia in loft | PCR | Rileva rapidamente una bassa carica virale |
| Valutazione degli anticorpi post-vaccino | ELISA | Scalabile e conveniente |
| Sessaggio dei giovani piccioni | PCR | Veloce e affidabile |
| Controllo dello stato di infezione passata | ELISA | Rileva gli anticorpi derivanti dall&#039;esposizione |
| Sorveglianza ambientale | PCR | Sensibile all&#039;RNA virale nell&#039;aria/acqua |

## Riferimenti

- Alessandro, D. J. (2000). Malattia di Newcastle e altri paramixovirus aviari. *Rivista scientifica e tecnica (Ufficio internazionale delle epizoozie)*, 19(2), 443-462.
- Cieslak, M., Reismann, M., Cavaliere di corte, M., & Ludwig, UN. (2011). Colori dell&#039;addomesticamento. *Biological Reviews*, 86(4), 885-899.
- Ingvall, E., & Perlmann, P. (1971). Saggio immunoassorbente legato a un enzima (ELISA): Dosaggio quantitativo dell&#039;immunoglobulina G. *Immunochemistry*, 8(9), 871–874.
- Griffith, R., Raddoppiare, M. C., Orr, K., & Dawson, R. J. G. (1998). Un test del DNA per individuare il sesso della maggior parte degli uccelli. *Molecular Ecology*, 7(8), 1071-1075.
- Kidd, UN. H., et al. (2015). Diagnosi molecolare dei patogeni aviari. In *Avian Disease Manual* (7ed.).
- In una bolla, K., & Faloona, F. (1987). Sintesi specifica del DNA in vitro tramite una reazione a catena della polimerasi. *Methods in Enzymology*, 155, 335–350.
- OIE. (2021). Manuale di test diagnostici e vaccini per animali terrestri.
- Saif, Y. M. (2020). *Diseases of Poultry* (14ed.). Wiley-Blackwell.
- Spackmann, E., Assonnato, D. UN., Cieco, l. l., Myers, T. J., Perdona, M. l., Garber, l. P., … & Suarez, D. l. (2002). Sviluppo di RT-PCR in tempo reale per la rilevazione del virus dell&#039;influenza aviaria. *Avian Diseases*, 46(3), 637-645.

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- [Viral PCR Panel](/pigeon-viral-infections-pcr-test-seno-biotech/)
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